液體培養(yǎng)基的常見(jiàn)問(wèn)題

　　液體培養(yǎng)基是最為常見(jiàn)的培養(yǎng)基類型，它具有可進(jìn)行通氣培養(yǎng)或振蕩培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì)，因?yàn)樗牧鲃?dòng)性便于精確控制培養(yǎng)基的溶液溫度、營(yíng)養(yǎng)濃度和氣體含量等；它對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)的附著能力要求小，細(xì)胞可快速擴(kuò)增；當(dāng)需要大量細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)也更經(jīng)濟(jì)高效。那么你知道液體培養(yǎng)基的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！

　　一、液體培養(yǎng)基為什么顏色不一樣

　　酚紅加量不同，導(dǎo)致顏色差異：DMEM＞MEM＞DMEM/F12＞RPMI1640＞F12&F10。

　　二、培養(yǎng)基放冰箱里顏色變深

　　空氣中CO2濃度低，培養(yǎng)基內(nèi)CO2會(huì)逐漸溢出，HCO3-減少，造成培養(yǎng)基偏堿。

　　三、含有谷氨酰胺培養(yǎng)基的保存條件

　　谷氨酰胺對(duì)溫度敏感，溫度越高降解速度越快。谷氨酰胺在溶液中不穩(wěn)定，單獨(dú)保存應(yīng)置于-20℃冰箱中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基應(yīng)存放在2°C–8°C，或者購(gòu)買(mǎi)不含谷氨酰胺的培養(yǎng)基使用時(shí)添加。

　　四、液體培養(yǎng)基可以放-20℃及以下保存嗎

　　不可以。在-20℃下，培養(yǎng)基中的鹽容易析出，培養(yǎng)基融化后，有些鹽無(wú)法重新溶解，從而導(dǎo)致滲透壓降低。液體培養(yǎng)基放在2-8℃長(zhǎng)期保存。液體培養(yǎng)基保存要避光。培養(yǎng)基中的某些成分遇光會(huì)產(chǎn)生過(guò)氧化氫，具有細(xì)胞毒性

　　五、購(gòu)買(mǎi)的液體培養(yǎng)基可以保存多久

　　理論上只要保存得當(dāng)，保質(zhì)期范圍之內(nèi)都可以用。但實(shí)際開(kāi)瓶后保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致液體培養(yǎng)基中鹽分的析出和pH值的改變，因此建議開(kāi)瓶后盡快用完

　　六、更換培養(yǎng)基后細(xì)胞長(zhǎng)不好

　　（1）各廠家培養(yǎng)基配方并非完q相同，可能細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)當(dāng)前的培養(yǎng)體系；

　?。?）原代細(xì)胞更容易適應(yīng)新的培養(yǎng)基，而傳代細(xì)胞系更換比較難；

　?。?）剛復(fù)蘇的細(xì)胞不要用來(lái)適應(yīng)新培養(yǎng)基，細(xì)胞活率低，待狀態(tài)穩(wěn)定后再用來(lái)馴化；

　?。?）敏感性細(xì)胞適應(yīng)培養(yǎng)基，需要多馴化幾代，期間細(xì)胞死亡數(shù)量減少，生長(zhǎng)緩慢是正常現(xiàn)象。

　　七、DPBS和PBS有什么區(qū)別，能通用嗎

　　都屬于磷酸鹽緩沖液，成分上只有一點(diǎn)點(diǎn)磷酸鹽的含量差異，均有等滲和調(diào)節(jié)pH的功能，大多數(shù)對(duì)于細(xì)胞的使用上可以通用。

　　八、HBSS和PBS/DPBS有什么區(qū)別

　　HBSS緩沖液中鹽成分較PBS和DPBS更復(fù)雜，且含有葡萄糖，可為細(xì)胞提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)，而PBS/DPBS不能提供營(yíng)養(yǎng)。

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